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      科研體系

      致力于生命研究、生物檢測技術的多領域開發

      蛋白表達概述

      蛋白表達(protein expression)即重組蛋白表達是指通過將目的基因重組克隆到人工載體(vector)上,再導入受體細胞或無細胞體系,在異源系統表達為蛋白的技術。
      蛋白表達可以解決天然蛋白難以獲得的問題。在上世紀七十年代首次創建異源基因的蛋白表達后,迄今已有數以萬計的重組蛋白成功表達,有力推動了生物技術的快速發展和生物醫學研究與產業的進步。

      目的

      通過蛋白表達,首先可以獲取難以從天然來源獲得的蛋白。
      其次,蛋白表達產物批量大純度高,不僅有利于對目的蛋白的分析,而且可以大幅度降低成本。
      更為重要的是,通常選用的重組蛋白表達宿主細胞生物安全性高,從而避免了一些病原宿主存在的潛在生物安全風險。

      方法

      主要包括基因片段克隆、導入表達體系、誘導表達及產物純化及分析等過程。

      分類

      蛋白的表達系統一般可以分為:
      1、原核表達系統:大腸桿菌是最為常用的蛋白表達體系,具有遺傳背景清楚、易于繁殖、成本低、表達量高等優點,但缺乏翻譯后修飾機制,不適用于需要糖基化或者特定位點切割等修飾的蛋白表達,因此適合于相對分子量小于100k且翻譯后修飾不影響結構和功能的蛋白表達??莶菅挎邨U菌也可用于蛋白表達,其優點是具有較強的分泌表達能力和較低的蛋白酶活性等,也逐漸受到關注。
      2、真核表達系統:可以實現不同程度的糖基化等翻譯后修飾,更接近于來自真核蛋白的天然活性。主要包括 ① 酵母表達系統(常用畢赤酵母、釀酒酵母等),酵母可高密度發酵又可以進行翻譯后修飾 ,兼具了原核和真核宿主細胞的優點,也是一種良好的蛋白表達系統。② 昆蟲細胞表達系統:外源基因通過桿狀病毒載體轉染昆蟲細胞進行表達,是一種真核蛋白的高表達體系,適合于一些在原核體系難以表達的蛋白,比如膜蛋白、大分子質量蛋白、蛋白激酶等。③ 哺乳動物細胞表達系統:哺乳動物細胞的翻譯修飾效率遠高于酵母、昆蟲細胞體系等,結構和功能更接近于天然真核蛋白,但表達量低、成本高。
      3、無細胞表達體系:可以從質粒和PCR產物直接表達目的蛋白,表達體系是無細胞提取物,來自于大腸桿菌、麥胚、兔網織紅細胞等。無細胞蛋白表達優點是可表達其它系統難以表達的產物、高通量、可自動化,但表達量低、成本高昂。

      • 技術特點

        目前已成功建立了原核表達體系、昆蟲細胞表達體系,并合作建立了哺乳動物CHO細胞的蛋白表達體系、無細胞表達體系,通過這些體系成功表達了多種目的蛋白。 我公司現具有獨特的包涵體蛋白復性技術和原核蛋白分泌表達體系。此外,還建立了氨基酸密碼子同義突變工藝,可以根據宿主細胞密碼子使用特征,對目的基因密碼子進行優化,可有效提高異源基因的表達效率和活性。

      • 咨詢電話:0755-26650513

      • 郵箱:sale@biocbd.com

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