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      科研體系

      致力于生命研究、生物檢測技術的多領域開發

      蛋白純化概述

      蛋白純化(protein purification)是從組織、細胞或者蛋白混合物中分離提取特定的目的蛋白組份的過程。
      蛋白純化既要使得分離的蛋白具有較高純度,同時又要保持蛋白質的生物學活性。因此,需要根據不同的蛋白性質設計一種或者多種組合提純方案。 蛋白的純化主要策略是利用不同蛋白質之間的相似性與差異性。依據蛋白之間的相似性可以去除非蛋白物質,再根據蛋白質的差異性將目的蛋白分離出來。特別是基因工程技術發展迅速,許多蛋白雖然通過基因重組方法可以實現表達,但蛋白純化的水平直接影響蛋白的純度和活性的高低,因此,蛋白純化仍是現代生物技術一個重大課題。

      目的

      蛋白分離純化所得到的蛋白一方面對于深入研究蛋白質的結構與功能至關重要,另一方面,蛋白的分離純化也直接影響蛋白的應用效果。因此,蛋白純化對于生物科學研究和應用有著重要作用,蛋白分離與純化技術也是生物產業中的核心技術。

      方法

      蛋白純化的原則是以合理的效率、速度、收率和純度,分離目的蛋白,同時仍保留其生物學活性和化學完整性。主要步驟包括選擇實驗材料,實驗材料預處理、蛋白提取、蛋白粗分級、蛋白細分級以及蛋白鑒定等過程。
      純化過程中必須注意:1盡可能減少對蛋白活性的影響,例如避免酸堿度過高或過低、高溫和重金屬等因素影響;2. 低溫條件下操作;3. 盡可能使樣品中蛋白質的濃度維持在較高水平。

      分類

      根據純化手段的類型,可以將蛋白純化分為:
      一,沉淀法,包括鹽析沉淀,利用鹽離子破壞蛋白表面水化層,暴露疏水區,繼而發生沉淀,達到初步純化目的;有機沉淀,利用有機溶劑降低水活度,破壞蛋白表面水化膜,導致蛋白沉淀。沉淀法是溫和的純化方法,但純度不高,可以作為初級純化步驟。
      二,透析法,包括透析袋和超濾法。通過透析和超濾,可以去除小分子雜質,而且可以置換蛋白基質溶液。
      三,層析法,包括分子篩凝膠層析、離子交換層析、親和層析(金屬螯合親和層析、蛋白A/G層析、受體蛋白、底物等)、疏水層析、反向層析及高效液相法等。通常需要兩種層析方法組合使用,才能達到較好效果,比如親和層析與離子交換層析組合。
      除以上方法外,還有其它多種純化手段,例如密度梯度離心法適合于高純度蛋白的制備,但需要較高的實驗條件;蛋白結晶則適合于生物結構學分析,如用X衍射對蛋白晶體進行研究。

      • 技術特點

        我公司目前已建立了成熟完善的蛋白純化平臺?,F擁有GE公司AKTA系列蛋白純化儀、各類凝膠層析、親和層析、離子交換層析體系,以及蛋白濃度、純度、活性鑒定體系。我公司可根據不同目的蛋白特征針對性設計純化線路和方案,實現快速、高效對天然組織細胞和重組蛋白產物進行蛋白純化。

      • 咨詢電話:0755-26650513

      • 郵箱:sale@biocbd.com

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