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      科研體系

      致力于生命研究、生物檢測技術的多領域開發

      基因克隆概述

      基因克?。╣ene cloning)是將提取或合成的目的基因,與具有自主復制能力的載體(vector)基因拼接重組,并導入受體細胞進行無性繁殖從而形成新的基因分子的過程。
      自上世紀七十年代創建第一個重組DNA分子克隆以來,基因克隆成為分子生物學的核心技術,促進了生物分子學進步,也有力推動了生物醫學研究和產業的快速發展。

      目的

      基因克隆技術首先有助于精準分析目的基因的表達與調控、蛋白相互作用,包括調控元件、轉錄因子研究以及非編碼RNA研究等;其次,可以用于難以獲取的天然蛋白的大規模生產;然后,可用于定型改造生物基因組結構,使之具有更大應用前景。此外,近年來隨著基因測序與分析需求的增長和新一代測序技術(NGS)的發展,基因克隆技術也發揮著日益重要的作用。

      分類

      根據基因克隆的類型,可以分為以下三大類:
      一、經典基因克隆,需要限制性內切酶和連接酶。這也是目前應用最為廣泛的基因克隆手段,具有操作簡便的特點,但受制于限制性內切酶酶切位點和連接酶效率,一般適合于小片段基因克隆。
      二、需要修飾酶的基因克隆,不需要限制性內切酶和連接酶,提高了基因克隆的靈活性和應用空間,如UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)克隆法,具有操作簡單、克隆效率高的特點。
      三、需要重組酶的基因克隆,利用重組酶及其特異識別位點,實現快速、高效的靶向克隆,不僅可實現高通量克隆,還可適合于原核生物、酵母、昆蟲細胞及哺乳動物細胞等多系統的表達載體。目前,基于重組酶的基因克隆技術,如GateWay技術和Golden Gate技術等得到普遍關注。

      方法

      經典的基因克隆方法主要包括:目的基因制備、限制性內切酶消化切割目的基因和載體、用DNA連接酶連接酶切后的基因和載體,制備DNA重組體;將DNA重組體導入宿主細胞、篩選克隆及鑒定以及目的基因在宿主細胞中的擴增和表達等步驟。

      • 技術特點

        我公司已建立了成熟完整的基因克隆研發平臺,不僅擁有多種克隆載體與表達載體,還有不同類型的宿主細胞,以及完善的基因操作流程和規范,保證了目的基因的準確高效克隆。特別是在基因密碼子優化、表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取等方面具有豐富的經驗,實現了多種蛋白在原核表達系統中高通量、高純度、高穩定性的表達。

      • 咨詢電話:0755-26650513

      • 郵箱:sale@biocbd.com

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